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BP具有促进hDPSC成骨分化的作用2023-03-31 08:34:25

ARS染色来评估成骨后期细胞外基质的矿化程度。ARS染液可以与钙结节结合形成红色复合物,其染色的深浅可以用来比较矿化程度高低。ARS染色结果显示,与对照组相比,BP组染色明显更深,矿化结节数目也更多,其中15.0μmol/L BP组稍显优势。成骨活动是一种多因素共同调节的过程。OCN,又称骨钙素,表达了骨基质中的大量无胶原蛋白,在成骨细胞增殖分化并与矿化基质结合的过程中发挥重要作用,是增强骨强度必须的。

RUNX2又称核心结合因子和成骨特异因子,属于RUNX转录因子家族。RUNX2可以上调成骨相关基因,在成骨细胞的发育早期阶段十分关键,一旦成骨细胞开始表达RUNX2,就会进入一个高表达ALP、OCN等成骨相关蛋白的增殖阶段。OPN基因可编码骨桥蛋白,在骨成熟的过程中该基因广泛表达于矿化组织内。OPN的表达由RUNX2基因调控。在骨成熟的早期阶段,RUNX2、ALP、OPN表达较高,而在成骨分化晚期OCN表达量较高 。qRT⁃PCR结果可见,BP组成骨指标较对照组显著升高,15.0μmol/L BP组在促进成骨分化方面较其他两组有更明显的效果。免疫印迹实验及灰度值分析结果证明,与对照组相比,BP组成骨相关基因及蛋白表达均有明显升高,与qRT⁃PCR结果相印证。以上结果从分子水平证明了BP具有促进hDPSC成骨分化的作用。
 
文献报道,香豆素类化合物可以抑制受体激活因子NF⁃κB配体诱导的小鼠单核巨噬细胞向成熟的多核破骨细胞分化的能力,并通过与雌激素受体结合激活雌激素反应性PI3K/Akt轴,刺激下游GSK3β/β⁃catenin通路的激活,从而增强骨形成。BP作为植物雌激素的一种,其可能通过类似机制对成骨活动产生促进作用。Western blot及qRT⁃PCR结果均证明BP可致hDPSC 中RUNX2表达上调,说明TCF7/LEF1通路可能也被激活并参与成骨活动。
 
出自《手柑内酯对人牙髓干细胞成骨分化的影响》作者丁浩南,严佳,唐诗佳.