牛iPSCs培养中的关键因素2023-05-09 08:49:39
2017年，Zhao等获得了能传50代以上的biPSCs，同时可以进行单细胞建系。尽管已经报道了可持续转基因表达的biPSCs，但大多数研究表明，获得的biPSC、仍然不能在长期培养中保持多能性。目前建立的biPSC还没完全通过多能性检测，畸胎瘤和嵌合体的形成检验。由于缺乏足够的培养条件，且牛成纤维细胞存在一种表观遗传阻滞，阻止了完全重编程，真正意义上的biPSCs还未能建立，从而阻碍了biPSC、下游的进一步应用。因此，biPSC、的建立还需进一步优化。biPSC、建立中重编程系统的选择、诱导因子的选择、小分子化合物的添加等方面展开综述，以期为进一步完善牛iPSC、及牛胚胎干细胞系的建立提供参考。利用整合型病毒将重编程因子导人体细胞中从而实现过表达是获得iPSC、的经典方式，但这不可避免地会造成外源基因插入、基因突变及致瘤等问题，限制了iPSC、的临床适用性。随后研究人员又尝试采用其他更安全高效的方法产生iPSCs,如使用腺病毒。或仙台病毒等非整合型病毒，或直接用蛋白、MicroRNA、小分子物质等重编程。与病毒系统相比，非病毒系统的方法减少了外源基因的插入，甚至避免了病毒感染和引起免疫反应，极大的提高了iPSC、的生物安全性。但考虑到重编程效率和操作难易程度等问题，更多还是采用逆转录病毒或慢病毒的方法诱导牛细胞为biPSCs，部分非整合型基因传递方法的优缺点。2011年，Sume等通过逆转录病毒系统将5个人源转录因子导入成年牛耳部成纤维细胞，首次成功获得了biPSCso 2012年，Can等用慢病毒系统将猪源SOX2, C-MYC,KLF4和人源OCT4将牛胎儿成纤维细胞诱导成可分化为雌性生殖细胞的iPSCs。
出自《牛诱导多能干细胞的建立及应用研究进展》作者曾虹,曾睿琳,付伟.
