超速离心法在不同的研究中均被证明有效2023-05-23 08:44:04
Rhim等应用ZP3诱导小鼠出现自身免疫性卵巢炎，类似于人类自身免疫性POI，此后大量学者均采用该方法构建免疫性POI模型进行实验研究。本课题组经多次实验验证，建模后的模型动物在卵巢组织结构和功能上均与人类自身免疫性POI表现相似，拟合度及成功率较高，因此选用ZP3多肤构建自身免疫性POI动物模型。自1980年Exo在网织红细胞成熟过程中首次被分离出后，越来越多研究证明，大多数细胞如间充质干细胞、B细胞、T细胞、上皮细胞、内皮细胞及少突胶质细胞等均可释放Exo。本研究通过超速离心法得到纯度较高的hBMSC来源Exoo。Exo的分离和纯化方法包括超速离心法、超滤法、尺寸排斥色谱法和基于微孔板的磁免疫捕获法。虽无统一鉴定标准，但超速离心法在不同的研究中均被证明有效，且其分离Exo纯度和回收率高，同时最大限度减少蛋白质聚集体和其他膜粒子的共纯化，有利于保护Exo的功能，是目前分离提纯Exo的主要技术。BMSC作为最经典的间充质干细胞，取材方便，易分离培养。BMSC分泌的Exo可携带多种物质如蛋白、miRNA及脂类等，抑制外周血单个核细胞分泌干扰素丫，并具有免疫调节、组织修复刺激、迁移、增殖、抗炎和抗氧化作用。在体外，鼠源BMSC-Exo可被化疗损伤的颗粒细胞内吞，抑制颗粒细胞凋亡;在化疗导致的卵巢早衰模型中，小鼠卵巢原位注射Exo后可促进卵巢内血管生成，改善小鼠的卵巢结构和功能。本研究中kgn细胞成功摄取了hBMSC来源Exo，且与共孵育24h相比，48h的摄取量更多，初步说明Exo能被体外细胞摄取，且Exo摄取量与共孵育时间也有一定关系。
出自《人骨髓间充质干细胞来源外泌体分离、鉴定及卵巢摄取》作者杨雨涛，王袁，谢嘉欣.
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