Exo在自身免疫性POI的治疗作用及其机制2023-05-23 08:45:38
提取及鉴定人骨髓间充质干细胞来源外泌体，探讨颗粒细胞及自身免疫性早发性卵巢功能不全小鼠卵巢摄取外泌体的情况。方法取P3至P9代hBMSC培养上清液，倒置显微镜下观察P4代hBMSC细胞形态，超高速离心法提取外泌体;纳米流式仪测外泌体粒径;透射电镜观察外泌体形态;Western blot检测外泌体标志蛋白CD63,CD9,肿瘤易感基因101表达。在免疫性POI小鼠体内观察到腹腔注射Exo后其卵巢组织摄取Exo的现象，证明Exo可到达小鼠卵巢组织，被卵巢组织摄取内吞，但还需进一步明确hBMSC来源Exo在自身免疫性POI的治疗作用及其机制。在体内，不同的注射方式会影响Exo摄取。动物体内注射Exo常用方法有尾静脉、腹腔及原位注射，其中尾静脉注射较为常用。静脉注射Exo在肝、脾和肺中富集，容易导致静脉堵塞，被血液中的巨噬细胞清除掉，影响Exo到达靶器官从而减弱治疗作用。腹腔注射Exo可形成更分散的分布模式，且在内脏脂肪组织中可观察到明显的Exo积累。与静脉或腹腔注射Exo相比，原位注射Exo虽然可减少脱靶递送并增加靶组织的暴露并减少Exo的清除。但其更具有创性，易造成动物的大量失血或感染甚至死亡。在Exo治疗化疗致POI的研究中，多数研究者采用尾静脉注射方式进行体内动物实验，极少数会采取原位卵巢注射及腹腔注射方式。本研究采取腹腔注射Exo的方式，观察到Exo在第2次注射后的第14天可以归巢到小鼠卵巢中，证明腹腔注射的可行性。综上所述，本研究顺利分离提纯出hBMSC来源Exo，并观察到KGN细胞及自身免疫性POI小鼠卵巢组织能够摄取Exo，为相关研究者提供参考。
出自《人骨髓间充质干细胞来源外泌体分离、鉴定及卵巢摄取》作者杨雨涛，王袁，谢嘉欣.
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