ＲT-PCＲ法是最常用的 CTC 检测方法，基于上皮特异性转录本和肿瘤特异性转录本在癌细胞高表达，在正常细胞不表达，通过将 CTC 数转化为探针数，检测快速、灵敏高效、成本低，不需分离CTC，然而以 ＲT-PCＲ检测 CTC 的方法可能因特异性标志缺乏出现假阴性、非特异性扩增呈现假阳性，以及无法获得活的 CTC 用于下游培养和单细胞测序，其转录本在活 CTC 和死 CTC 都会表达，难以进一步区分，免疫亲和技术的出现在一定程度上克服了ＲT-PCＲ的缺点，阳性富集法如 Cellsearch 是利用抗上皮细胞粘附分子（ EpCAM） 抗体包被的磁珠富集CTC，使 用 DAPI，CD45，CK 等抗体鉴定CTC，是最常用的免疫学检测方法，其特异性相对较好，另一些阳性富集法如 AdnaTest 和 CELLectionTM，Dynabeads 是基于 EpCAM 抗体和 MUC 1抗体、EＲBB2 抗体捕获分离 CTC，使用多重 ＲT-PCＲ检测 CTC上肿瘤相关转录本。这些方法同时选择多种抗体捕获 CTC，可以增加 CTC 捕获数，增加其检测的灵敏度。
 

但是，上述阳性富集法因部分CTC会经历上皮间质转化，产生干细胞或间充质表型，使得某些 CTC 的上皮标记物和肿瘤特异性标记不表达，也会导致 CTC 漏检产生假阴性，或因尿路感染等原因使得正常上皮细胞脱落可能导致假阳性的发生，而阴性富集法似乎能克服漏检的 CTC，但因血液中白细胞数量繁多，使用 CD45 等抗体阴选CTC难以达到高纯度，而且不能将传统CTC与循环肿瘤微栓区分开来。
 

出自《溶瘤病毒检测循环肿瘤细胞在膀胱癌精准治疗中的应用展望》作者李仕林，唐勇。