外泌体的分离纯化主要基于其化学、物理和生物特征，常用于分离外泌体的方法主要包括超速离心法、超滤法、聚合物沉淀法、免疫亲和分离法和排阻色谱法，但仍以超速离心法作为外泌体分离的“金标准”。然而，现有的传统技术仍存在产量低、纯度低、回收率低、成本高、提取过程复杂等问题，研究人员更倾向于结合不同的分离技术互补优化分离结果。鉴于外泌体的高度异质性及目前研究现状，开发通用的外泌体分离方法比较困难。为突破外泌体转化应用的瓶颈，提高分离效率，探索新的分离技术并结合多种技术选择性应用是当前可行的解决方案。
 

外泌体的表征需要从3个方面考虑，包括外泌体表面蛋白标志物、外泌体大小的纳米颗粒追踪分析鉴定和外泌体形态的透射电子显微镜鉴定。国际细胞外囊泡学会建议需要评估2种类型的蛋白质以证明提取的成分为外泌体，主要包括热休克蛋白 (如热休克蛋白70、热休克蛋白90)、四跨膜蛋白超家族(如CD63、CD81)、内体分拣转运复合物相关蛋白(如肿瘤易感基因101蛋白)。虽然可根据外泌体的形态来完成表征，但纯化的外泌体形态的多样性对其提出挑战。ZABEO等观察到从人肥大细胞系HMC-1纯化的外泌体具有高度的形态变异性，这表明即使从单个细胞系中提取，也可能存在形态和功能的不同亚群。
 

出自《外泌体与皮肤创伤的修复》作者肖梓腾，王婷禹，张雯雯。