体外扩增HSPC的能力对于充分实现基于HSPC的疗法至关重要。但由于HSPC可用性有限，临床有效疗法（如脐带血移植）的应用受到了阻碍。目前常用的几种HSC的分离方法分别是对羟乙基梯度离心法、对羟乙基沉淀法、Percoll密度梯度离心法、Ficoll密度梯度离心法、免疫磁珠以及流式细胞术。免疫磁珠和流式细胞分选可以获得较纯的细胞群，但是细胞获得率比较低。羟乙基淀粉沉淀法虽然可以获得大量的细胞，但成分很复杂。Percoll和Ficoll是最常用的两种密度梯度离心法，这两种方法所获得的的单个核细胞群往往成分复杂，且纯度很低。但由于密度梯度离心法操作简单，细胞获得率高，目前在细胞分离中被广泛使用。
 

干细胞培养最关键的要求是要提供葡萄糖、维生素、氨基酸等基本成分的培养基，它们是干细胞代谢的重要成分，可以维持干细胞的生长和增殖。很多的基础培养基都可用于培养HSC，其中DMEM是广泛使用的改良版本的培养基之一，其维生素、氨基酸和其他补充剂的浓度是BME的四倍。由于HSC来源和数量有限，因此扩增HSC是一项艰巨的任务。最近一项轰动的研究发现，胶水的主要成分聚乙烯醇可以替代血清对HSC进行大量扩增，此方法不仅可以实现更高倍数的扩增，而且价格低廉。此外，3D培养已被证明是将研究结果转化为活体应用的更真实的模型，在可降解的两性离子水凝胶中对人类HSPC实行3D培养，实现了骨髓和脐带血来源的HSPC的大量扩增。目前的3D细胞培养模型和方法包括球体、类器官、微载体培养和3D生物打印，3D培养已被证明是将研究结果转化为活体应用的更真实的模型。
 

出自《造血干细胞生成免疫细胞的潜力及其应用研究进展》作者张雅琳，李娟娟，闫鹏辉.