MACS可以用于纯化心肌细胞2024-04-29 08:50:28
常用的纯化方法是细胞分选。使用FACS去除未分化的iPSC可以达到纯化心肌细胞的目的。Tang等提出了一种针对hiPSC表面SSEA-5的单克隆抗体，其能与hiPSC上特异表达的新型抗原结合，再通过FACS分离SSEA-5阳性的细胞，极大降低了畸胎瘤形成的风险。然而，仅使用SSEA-5并不足以除去所有残留的未分化细胞，研究者进一步将SSEA-5与另外两种多能表面标志物（CD9、CD90 或 CD50、CD200）结合能实现完全除去未分化细胞。除了FACS，MACS也可以用于纯化心肌细胞。Dubois等筛选出了特异性表达在iPSC-CM上的SIRPα，用针对SIRPα的抗体进行细胞分选，可以富集心脏前体细胞和心肌细胞，产生纯度高达98％的心肌肌钙蛋白T阳性细胞群。与FACS比较，MACS可以在更短的时间内分选更多的细胞。然而，FACS和MACS都需要针对细胞表面蛋白的特异性抗体，抗体污染有可能在移植后出现免疫原性反应和局部炎症。
近年来，研究者研发了一种新的纯化方法，先把miR-208a-CD4转入异质细胞群，miR-208a-CD4与心肌细胞中miR-208a的相互作用能抑制CD4在心肌细胞中的表达，而非心肌细胞因不表达miR-208a导致CD4仍表达；再通过CD4磁珠将非心肌细胞筛选去除，同时通过抗生素标记筛选去除未转染的细胞。该方法可以用于心肌细胞的大规模纯化，有效避免了抗体污染的问题，具有很大的临床应用潜力。研究发现，将iPSC-CM注射到大鼠、猪、猴等心肌梗死动物模型中，心脏功能能得以改善。将iPSC-CM直接注射到梗死心肌、经心脏的动静脉或冠状动脉注射到患者体内的方法也已普遍应用。
出自《基于诱导多能干细胞治疗急性心肌梗死的临床前研究进展》作者蔡松晏，戴青原.
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