Kempf等在100mL罐式生物反应器中悬浮培养iPSC，利用Wnt通路抑制剂CHIR99021调节心肌细胞分化，可产生纯度高达85％的约4000万个主要为心室样表型的心肌细胞。该研究成功将iPSC的扩增和心肌细胞的产生整合到悬浮培养的生物反应器中，为扩展心肌细胞提供了一个简化的、符合现行药品生产管理规范要求的方法。随着生物反应器培养技术的发展，大规模生产iPSC-CM将成为可能。
 

PSC-CM是一个异质性的细胞群，其中包含了未分化的iPSC以及分化生成的非心肌细胞，这些细胞群移植到宿主体内可能诱发畸胎瘤的形成。因此，在进行移植前，需要纯化iPSC-CM。目前，纯化心肌细胞主要包括代谢调节、细胞分选等方法。代谢调节是一种经济、有效的纯化iPSC-CM的方法。研究表明，在缺少葡萄糖而补充乳酸的培养基中，心肌细胞可以有效吸收和利用乳酸来维持ATP水平，心肌细胞存活率高，但非心肌细胞不能利用乳酸，细胞中ATP 水平会突然下降，导致大量细胞死亡。此外，谷氨酰胺也是iPSC生长所必需的物质。通过在缺葡萄糖和谷氨酰胺的培养基中添加乳酸，可以用来纯化心肌细胞。FACS显示，在代谢选择的第2天和第5天，心肌肌钙蛋白T阳性细胞的比例分别超过93％和98％，表明这是一种较好的心肌细胞纯化方法。
 

出自《基于诱导多能干细胞治疗急性心肌梗死的临床前研究进展》作者蔡松晏，戴青原.