细胞凋亡是制备dECM的有效方法2024-08-09 08:32:25
最近Bae等尝试使用两性洗涤剂联合核酸酶进行对人正中神经及腓肠神经进行脱细胞操作。具体步骤为：将神经片段用100mMCHAPS在磷酸盐缓冲液中处理1d。然后将神经片段转移到1M氯化钠溶液中15h。清洗后，将神经片段置于脱氧核糖核酸酶I和核糖核酸酶A中37℃作用24h，然后每12小时更换1次磷酸盐缓冲液，洗涤剩余试剂72h。样品脱细胞后保存在磷酸盐缓冲液中，温度为4℃。脱细胞后即刻进行组织学分析和DNA定量。他们同时对比了使用tritonX-100和SDC脱细胞的效果，结果显示使用两性洗涤剂和核酸酶的脱细胞效果（包括脱细胞程度、细胞外基质完整性、胶原保留量、DNA清除率等）要优于使用tritonX-100和SDC。诱导细胞凋亡后再洗脱细胞残留物制备dECM最先由Bourgine等提出，其利用细胞凋亡的内源性和外源性启动程序及凋亡环境调控设计了一套脱细胞体系。Cornelison等则发现利用小分子细胞毒素（喜树碱）可诱导大鼠周围神经凋亡，配合高渗溶液及DNA酶的使用完成dECM的制备，将其移植入大鼠皮下后显示出比阴性对照组更低的免疫原性，证明了细胞凋亡是制备dECM的有效方法。目前诱导细胞凋亡制备dECM的相关报道仍较为有限，更多的诱导凋亡方法有待进一步研究提出并验证。
在正常的生物体中，细胞外基质的结构与成分并不是一成不变的，它与周围细胞不断发生相互作用，在特定的组织中与特定的细胞在各种生物酶或其他因素的影响下发生物理和生化特性的改变，以形成特定组织的机械或生化特性，如拉伸、压缩强度和弹性等。周围神经细胞外基质的主要成分为胶原蛋白、糖胺聚糖、纤连蛋白、层粘连蛋白等，这些成分对施万细胞和轴突的行为有着重要的影响。
出自《脱细胞基质水凝胶治疗周围神经损伤的研究进展》作者:刘业祖，刘如恩.
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