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SSCs体外长期培养条件具有重要意义2024-09-02 09:12:33

无法将啮齿动物的培养体系直接应用到家畜,家畜SSCs可能具有不同的生物学特征,其体外培养也可能需要不同的生长因子和培养条件,如培养基、饲养层(滋养层)细胞、血清、生长因子、适宜的温度和添加剂等均是影响SSCs体外培养的关键条件。家畜SSCs的研究有助于补充SSCs的研究内容,因此,深入研究家畜SSCs体外长期培养条件具有重要意义。

体外培养精原干细胞需要依据不同动物的种类,有针对性地选择合适的培养基进行培养。目前,DMEM培养基、DMEM/F12培养基、MEM培养基、KSOM培养基以及SFM培养基等较为常见。闫慧敏在DMEM/F12培养基中添加了GDNF、EGF和FGF2,成功将牛SSCs培养了6代以上。张茂等以睾丸支持细胞作为饲养层、在DMEM/F12培养基中对猪精原干细胞进行培养,15d后发现SSCs进行了大量增殖。Das等将富集的精原干细胞接种到支持细胞饲养层上,连续培养后发现无血清的MEMα培养体系比基于血清的DMEM培养体系的细胞集落直径更大、数量更多。Nabulindo等将SSCs接种在层粘连蛋白包被的培养板上,评估了MEMα、DMEM/F-12和StemPro-34TM SFM三种不同的基础培养基对肯尼亚山羊在无饲养层条件下的影响,发现StemPro-34TM SFM培养基具有最多的集落形成。
 
杨蕊的研究结果表明,饲养层(滋养层)细胞在经过有丝分裂阻断剂处理后,能够保持活性而不再增殖,并模拟SSCs微环境,为SSCs提供多种生长因子和递质,从而持续促进SSCs增殖或在一定程度上抑制其分化。睾丸支持细胞、小鼠胚胎成纤维细胞、小鼠胚胎成纤维细胞耐鸟苯苷亚系(STO细胞)等常用作饲养层细胞。张筱芫研究发现,在睾丸支持细胞饲养层培养的水牛SSCs增殖更快,说明支持细胞饲养层更适合水牛SSCs的体外培养。
 
出自《精原干细胞体外分离培养》作者:张淼荗,安雪姣,卢曾奎.