背部疼痛是常见临床症状，椎间盘退变是腰背部疼痛的主要原因之一 。目前采用药物及手术治疗椎间盘退变虽能部分缓解症状，但无法从根本上解除病因 ，因此椎间盘退变的生物治疗成为研究热点。研究表明，椎间盘退变的基础在于髓核改变，生物方法修复退变的髓核需要种子细胞及合适的支架材料。关于种子细胞的选择目前尚无定论，可选用的有BMSCs、脊索细胞、髓核细胞、脂肪源性干细胞、软骨细胞等，这些细胞各有优缺点。脊索细胞增殖缓慢，而BMSCs 取材简便，增殖迅速，具有多向分化潜能。因此，本研究以BMSCs 作为种子细胞，选用脊索细胞培养基共培养，观察脊索细胞培养基的功能，为生物治疗椎间盘退变选择种子细胞提供理论依据。
 

取日本大耳白兔2只，背部去毛，耳缘静脉注射10％ 水合氯醛（3mL/kg）死亡，无菌条件取出兔胸腰段脊柱，立即转移至无菌超净工作台上。无菌条件下取出髓核组织放入一小玻璃瓶中，眼科剪剪碎，0.25％ Ⅱ型胶原酶消化 15 ～ 20 min，200 目滤网过滤；细胞滤液以离心半径 12 cm、1 000 r/min 离心 5 min，收集沉淀。DMEM/F12（含15％FBS）培养基悬浮细胞，置于37℃、5％CO2 细胞培养箱中培养5 ～ 7d，收集未贴壁细胞用于分离。配制均分为5层的Percoll液，漂浮密度分别为1.007 ～ 1.035，将上述收集细胞置于Percoll液离心，吸取 1、2 层细胞即为脊索细胞。PBS 洗涤2次，DMEM/F12（含15％FBS）培养基悬浮细胞，调整细胞密度为5.0 × 104 个/mL 后进行培养。每天倒置相差显微镜观察形态学变化。培养4d后收集培养瓶内脊索细胞培养基，同上法离心5min后提取上清液，4℃冰箱保存备用。
 

出自《脊索细胞培养基促进索细胞培养基促进BMSCs 增殖分化的研究》作者马凯歌,邵增务,王佰川。