免疫荧光检测脊索细胞培养基对BMSCs 蛋白多糖及Ⅱ型胶原表达的影响取24孔板，将其分为两组，每组12孔。每孔先放入细胞爬片，用0.1 mg/mL多聚赖氨酸包被各孔。两组每孔均接种BMSCs细胞悬液（细胞密度6×104 个/mL）100μL，实验组加入脊索细胞培养基250μL，对照组加入含 15％FBS的DMEM培养基250μL。
 

置于37℃，5％CO2细胞培养箱培养，每2天换液 1 次。分别于培养 7、14 d 每组各取6孔，将细胞爬片用4％多聚甲醛固定20min，加入Triton X-100 破膜20min，封闭血清30min；吸出多余封闭血清不洗，加一抗兔蛋白多糖IgG（每组各 3 孔），兔Ⅱ型胶原IgG（每组各3孔），4℃孵育 24 h；加入二抗室温孵育 2 h，加入FITC（标记蛋白多糖）及 CY3（标记Ⅱ型胶原），37℃孵育 1 h，采用 Hoechst 33342 染核，取出细胞爬片甘油封片后于激光共聚焦显微镜下观察，红色荧光为Ⅱ型胶原表达阳性，绿色荧光为蛋白多糖表达阳性。
 

出自《脊索细胞培养基促进索细胞培养基促进BMSCs 增殖分化的研究》作者马凯歌,邵增务,王佰川。