细胞预处理的方式主要包括缺氧、3D培养、细胞因子、各种物理或化学刺激等。低氧条件下培养的许多特定细胞类型，包括间充质干细胞，常有着更强的增殖能力。研究表明，缺氧可能通过激活糖酵解来提高间充质干细胞的增殖和遗传稳定性。此外，缺氧还可诱导缺氧诱导因子的激活，进而激活血管内皮生长因子和C-X-C基序趋化因子受体4等血管生成基因的转录来促进血管生成。由于2D培养环境和体内3D微环境存在差异，3D培养下的间充质干细胞有着更好的增殖分化特性，进而增强外泌体的治疗特性。目前，3D-外泌体在内皮细胞增殖、迁移和血管生成等多种损伤修复方面具有独特的优势。
 

细胞因子已被证明可以提高旁分泌效率，并调节间充质干细胞中不同潜在治疗因子（包括外泌体）的产生和释放。一项研究就发现白细胞介素1β处理间充质干细胞分离得到的外泌体显著抑制星形胶质细胞炎症反应。除以上处理外，间充质干细胞还易受到化学和物理刺激信号影响并改变其特性，进而调节外泌体分泌，这对组织修复和免疫调节具有关键作用，众多预处理方式，目前仅缺氧处理获得的工程化外泌体促组织修复机制研究较明确，因此应用较广泛，其余处理方法的潜在机制有待进一步研究。
 

出自《工程化外泌体修复组织损伤：应用潜力及优异的生物稳定性和靶向特异性》作者:罗文彬，李若云，潘超凡.