Muse细胞在多能性和分化能力上优于贴壁培养2024-12-06 08:19:21
Muse细胞可以在悬浮和贴壁培养条件下生长,但其表型存在明显差异。悬浮培养的Muse细胞倾向于形成胚胎样细胞团,保持其自我更新能力和多能基因的表达。相比之下,贴壁培养的Muse细胞主要通过不对称细胞分裂增殖,产生一个非Muse细胞和一个新的Muse细胞。由于Muse细胞比MSC增殖慢,其在总细胞群中的比例逐渐减少。当贴壁培养的Muse细胞转移至悬浮液中时,Oct3/4、Nanog和Sox2的表达显著增加,比贴壁培养时高出50倍至数百倍。尽管悬浮培养的Muse细胞在多能性和分化能力上优于贴壁培养,但当细胞增殖到一定程度后,悬浮培养的细胞会停止增殖。一项实验表明,在低吸附培养皿中培养Muse细胞33天后,几乎所有细胞均发生凋亡,推测其原因可能是细胞团内部缺乏营养和物质交换。因此,要实现Muse 细胞的转化应用,亟需高效的扩增培养方法以获得高纯度的Muse细胞。
基于MSC中Muse细胞和非Muse细胞的应激耐受能力差异,采用长时间胰酶消化的方法,可有效提纯Muse细胞。Kuroda等在经典的培养方法中,将经过8小时LTT后的骨髓MSC加入低吸附培养瓶中培养7天,观察到不同大小的细胞球。随后,将细胞接种到普通培养瓶进行贴壁培养,通过多个LTT-成球-贴壁周期的重复,最终实现Muse的增殖。然而,此方法耗时较长,仅能获得Muse细胞总数的增加,未能达到获取高纯度Muse细胞的目的。微载体是一种直径为50-300μm、密度略大于水的微珠材料,表面适合贴壁细胞生长。
出自《多系分化应激耐受细胞与间充质干细胞的比较优势及其在再生医学领域中的研究进展》作者:鲁哲,任世凤,王冰洁
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