捕获分子改变细胞外囊泡的物理和生物学特性2024-12-27 08:33:18
尺寸排阻色谱法也是基于尺寸进行分离,但其应用范围较窄,不适合大体积样品。免疫亲和捕获技术是利用细胞外囊泡某些表面蛋白和受体来开发的,其分离的细胞外囊泡产量相对较低但纯度较高。基于标记的微流控技术可根据化学或物理性质特异性地与细胞外囊泡表面相应的脂质成分或蛋白质结合,但是成本相对较高,标记操作复杂,捕获分子也可能改变细胞外囊泡的物理和生物学特性。为了减少标记对后续实验的影响,研究者们提出了无标记分离策略,可以保证细胞外囊泡的结构和生物完整性。单一的细胞外囊泡分离方法总存在或多或少的不足,利用互补的组合分离策略以获得更高纯度和产量的细胞外囊泡制剂,可能是未来潜在的解决方案。为了保证细胞外囊泡制剂实现可重复安全和有针对性的治疗,在应用前需要对其进行表征。目前可用的方法允许确定细胞外囊泡的大小、浓度、形态和特定内容物。成像技术常用的方法包括扫描电子显微镜、透射电子显微镜、冷冻电镜和原子力显微镜。扫描电子显微镜是通过捕获发射的电子来创建细胞外囊泡表面形貌的图像,无法区分囊泡和非囊泡粒子;
相比之下,透射电子显微镜可提供囊泡内部的附加信息,不过测量结果可能会受到样品制备程序的强烈影响;冷冻电镜通过冷冻固定技术可以很好地保留水合囊泡的实际形态,从而避免传统固定造成的伪影;原子力显微镜同样能够捕获天然细胞外囊泡结构,但需要在不同的实验条件下进行分析,这对实验设备和用户操作提出了很高的要求。不同于成像技术,基于尺寸测定和计数的技术可以获得关于细胞外囊泡尺寸分布和浓度的更精确信息,常见的方法有纳米粒子跟踪分析、动态光散射、可调电阻脉冲传感和微流体电阻脉冲传感。
出自《工程化细胞外囊泡修复骨缺损的再生作用》作者:周洋,刘可鑫,王得利.
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