红细胞代谢物萃取方法2021-12-01 09:09:42
实验组红细胞内葡萄糖在D0较对照组高,在D14和D35均显著低于对照组。说明脂肪血红细胞体外储存期间葡萄糖消耗量较正常红细胞大,代谢活动比正常红细胞活跃;3个储存阶段实验组红细胞内腺嘌呤均高于对照组,说明实验组细胞内腺嘌呤的消耗量较对照组少; D14实验组细胞内丙酮酸低于对照组,葡萄糖通过糖酵解途径产生的丙酮酸较少。综合红细胞内腺嘌呤和丙酮酸含量结果,说明脂肪血制备的红细胞内消耗的葡萄糖,通过糖酵解途径进行能量代谢的量较正常红细胞少。脂肪血制备的红细胞内GSSH含量较对照组高,GSH较低,说明脂血红细胞相对正常红细胞来说胞内处于高氧化状态,红细胞需要大量消耗 NADPH 来维持细胞内还原状态,同时产生烟碱酰胺。因此,实验组红细胞内代谢途径向着磷酸戊糖途径转换。由于实验组红细胞内磷酸戊糖代谢途径明显较对照组活跃,消耗的葡萄糖大量用于产生还原当量 NADPH。随着红细胞内NADPH的消耗,其产物烟碱酰胺含量上升,导致实验组红细胞内烟碱酰胺含量高于对照组。
本研究成功地建立了红细胞代谢物萃取方法,并成功地萃取了红细胞中的代谢物。利用UPLC-MS/MS方法检测红细胞萃取物中的小分子代谢物,成功构建了脂肪血红细胞的PCA和OPLS-DA模型。通过分析脂肪血红细胞储存期糖酵解途径和磷酸无糖途径的代谢物变化,分析脂血制备的去白细胞悬浮红细胞储存期的代谢特性。通过上述研究得出,脂肪血制备的悬浮红细胞在储存期葡萄糖消耗量较正常血制备的红细胞大,代谢活动较正常红细胞活跃。储存期内脂肪血红细胞内能量代谢减弱,同时,磷酸戊糖途径增强。
出自《脂肪血制备的去白细胞悬浮红细胞储存期代谢特性研究》作者杨俊鸿。
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