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外泌体分离纯化技术的优化与创新2025-04-21 08:43:59

虽然超速离心法是外泌体分离的金标准,具有高处理能力,但是该方法常受到蛋白质污染的影响。并且外泌体的质量和功能会受到细胞来源和纯化条件的显著影响,用于治疗目的的外泌体检测的主要技术挑战之一是区分来自正常细胞的外泌体和从受损细胞中分离的外泌体。其次,外泌体需要进行伦理审查,供体细胞的选择需要遵守相关规定。目前外泌体miRNA治疗缺乏大量临床试验,目前在ClinicalTrials.gov上注册的关于外泌体与CVD的临床试验仅46项。

此外,外泌体miRNA疗法无法完全确定给药的最佳剂量,治疗CVD后的不良反应也尚不完全清楚。针对上述问题,外泌体miRNA应用的改进方案正被积极探索。在生产方面,多种三维培养技术已被证实有效,其中包括微阵列孔板、旋转瓶培养以及中空纤维生物反应器等。这些方式不仅提高了外泌体的产量,还实现了特定基因表达水平的上调,从而为外泌体的基础研究和临床应用提供了更为可靠的实验模型。此外,人工外泌体正在开发中。简单来说,人工外泌体就是将脂质体与肽结合形成复合物,具有较低的免疫原性效应、更高的胶体稳定性和更好的生物半衰期。目前已有人工外泌体进入临床应用。
 
在分离外泌体方面,工作人员可以根据样本的性质和研究目的考虑使用多种分离技术,从而扬长避短。例如,先应用聚合物沉淀进行预处理,再使用免疫亲和捕获方法处理大体积样品。这种方式既可提高其分离的效率,又可避免使用过量的昂贵抗体,从而做到经济和高效。此外,多种检测分离技术也正在发展,电阻脉冲传感技术可以根据外泌体通过小孔时的电阻来测量外泌体的大小,该技术可检测直径为50~1000 nm的囊泡。
 
出自《外泌体miRNA与心血管疾病》作者:刘方玥儿,杨杰,蒋建利.