随着第二代测序技术的迅猛发展，使得地贫基因检测更加精准和全面。DNA测序是将DNA样本经PCR扩增后，利用DNA测序仪进行序列分析，该技术现已成为对未知突变分析的金标准。Dipali等通过高通量测序技术对一对怀孕夫妇进行β-地贫检测，结果发现丈夫带有β-地贫基因杂合突变（位点：c.92+5G＞C，IVS I-5 G＞C），妻子虽然没有β-地贫基因突变但测序结果显示带有HbE样镰刀性贫血杂合突变（c.79G＞A），妻子羊水的DNA 检测结果发现胎儿同时遗传有这两个杂合位点的突变，该结果与临床表型和常规检查结果一致。
 

传统获取胎儿遗传物质进行的产前诊断为有创性操作，即通过穿刺手术采集绒毛、羊水或脐带血，这就可能造成胎儿损伤、流产或宫内感染等风险。1997年Lo等利用PCR技术在妊娠12~40周孕男胎的孕妇血浆和血清中检测到睾丸决定基因（SRY）的特异性序列，确定是胎儿游离DNA的存在。2010年该课题组借助高通量测序技术对母体外周血中胎儿的所有基因组进行测序，并绘制了全部基因组图谱，结果显示利用母血中 cffDNA 对胎儿基因检测的诊断方法结果是完全可靠可行的。基于以上特点，cffDNA已成为非创伤性产前诊断最理想的靶标物质。2012年Lam等利用母体中胎儿游离DNA，对两个胎儿的β-地贫基因突变类型进行检测，得出的实验结果与胎儿绒毛实验结果完全相同。Kwan等应用靶向富集液相杂交与测序技术结合对两个家庭进行地贫无创性产前诊断，通过数据分析显示，两个胎儿均为杂合子携带者。所以基于二代测序技术在无创产前诊断地中海贫血会越来越广泛。
 

出自《地中海贫血基因检测与基因治疗》作者胡俊杰，陈鑫苹，符生苗。