体外诱导黑素细胞分化的培养体系优化策略2025-06-23 08:34:15
毛囊神经嵴干细胞诱导分化为功能性黑素细胞。脊椎动物的黑素细胞起源于外胚层的神经嵴，利用皮肤毛囊神经嵴干细胞可以在体外诱导分化为黑素细胞。毛囊神经嵴干细胞具有来源方便、含量高、无免疫原性或伦理问题等优点，在小鼠皮肤中移植毛囊神经嵴干细胞诱导分化的黑素细胞，可以有效促进黑素细胞再生。体外诱导毛囊神经嵴干细胞分化的黑素细胞，大多数可表达C-KIT、MITF、S-100B、TYRP1、TYRP2和酪氨酸酶等黑素合成相关酶类。将毛囊神经嵴干细胞来源的黑素细胞移植到小鼠背侧皮肤，其可在局部组织中存活，并表达黑素细胞标志蛋白。提示从自体分离毛囊干细胞进行体外黑素细胞诱导是获得功能性黑素细胞的潜在途径。毛囊神经嵴干细胞诱导为功能性黑素细胞，可分为扩大培养和诱导分化两个阶段。在扩大培养阶段，新鲜分离出的毛囊神经嵴干细胞使用DMEM/F12基础培养基进行培养，添加10％胎牛血清和2％B-27无血清添加剂，用以维持神经细胞的短期生长和活性，添加20ng/mL表皮生长因子和40ng/mL碱性成纤维细胞生长因子，以及1％青霉素/链霉素双抗。待细胞处于快速生长期时，开始诱导分化。
分化阶段使用DMEM/F12基础培养基，添加2％胎牛血清、4mML-谷氨酰胺、20μg/mL磷酸二酯酶抑制剂、200ng/mL促黑素细胞生长激素及1％双抗。该方法干细胞在12～14d汇合率达到60％～70％，在第20d可开始进行诱导分化，至分化的第14d，可检测到黑素细胞相关标志蛋白c-Kit、MITF、TYPR1、TYPR2的表达。在培养体系中加入来那度胺，可以显著促进人毛囊神经嵴干细胞迁移，加速其向功能性黑素细胞分化。
出自《干细胞诱导分化的黑素细胞治疗白癜风的研究进展》 作者:耿颖颖，黄鹏飞，王云馨.
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