iPS细胞向黑素细胞分化的高效诱导体系2025-06-23 08:57:48
继续培养至克隆形成，可检测到干细胞标志分子NANOG、REX1的表达，继续扩增培养12d，即成为iPS。第二阶段，将iPS诱导分化为黑素细胞。将iPS培养一天后更换为诱导分化培养基，以G254培养基为基础培养基，添加诱导因子0.2mM的CaCl2、50ng/mL干细胞生长因子、50ng/mLWnt-3a蛋白、20nMBMP4、0.3mM抗坏血酸、10-7M的脱羟维生素D3、100μM的α-MSH、0.1mM的L-酪氨酸、100μg/mL的转铁蛋白、10ng/mL的角质形成细胞生长因子、0.1ng/mL的集落刺激因子以及0.1ng/mL的肝细胞生长因子。以这种方式进行培养，可在20d内由105个iPS细胞诱导分化出106个功能性黑素细胞，效率较高。以成纤维细胞重编程获得的iPS，在诱导分化阶段使用培养基不同于T细胞，以DMED为基础培养基，添加50ng/mLWnt3a、50ng/mL干细胞生长因子、100μM内皮素-3、20pM霍乱毒素、50nM12-四癸烷酚-13-醋酸酯、4ng/mL的FGF-2、100μM的L-抗坏血酸、0.05μM的地塞米松、1mg/mL的亚油酸白蛋白、1×胰岛素转铁蛋白，培养2～3d，可见大量单个细胞从iPS细胞团中分离出来，继续培养4周左右，可观察到黑素细胞形态出现，并可检测到神经嵴干细胞和黑素细胞的标志蛋白。这种方法诱导的黑素细胞形态可维持数个月。
从人成纤维细胞和脂肪组织中分离的多系分化持续应激细胞 Muse细胞也可诱导分化为黑素细胞。Muse-MC表达酪氨酸酶、DCT等标志分子，
并具有酪氨酸酶活性。此外，Muse-MC可与成纤维细胞和角质形成细胞共同培养，构建三维重建皮肤，此皮肤呈现出表皮层结构，Muse-MC定位于表皮基底层，与人皮肤表皮结构相类似。因此，Muse细胞是未来研究皮肤重建的重要药物来源。
出自《干细胞诱导分化的黑素细胞治疗白癜风的研究进展》 作者:耿颖颖，黄鹏飞，王云馨.
下一篇： 无机复合材料对心肌组织修复的协同效应研究
