问：什么是Edu细胞增殖检测？2025-05-12 09:26:23
答：将爬片贴于12孔板底部，将真皮成纤维细胞按照1×104个/孔的密度接种在12孔板中，在细胞贴壁后，加入终质量浓度为10g/L的D-半乳糖溶液，在37℃、体积分数5％CO2孵箱中处理24h，分别加入终浓度为0.5，1，2，4，8mmol/L的AKG与细胞共孵育12h，去除培养液，加入37℃预热的2×Edu工作液（20μmol/L） 以及等体积的培养液，使Edu终浓度为1×，继续孵育细胞2h，Edu标记完成后去除培养液并加入500μL40g/L多聚甲醛室温固定15min，PBS洗涤3次，每孔加入500μL0.3％Triton-X室温破膜10min，PBS洗涤3次，将爬片置于载玻片上，每片滴加50μL Click反应液，室温避光孵育30min，吸去反应液，PBS洗涤3次，每片加入50μLHoechst（1∶1000）细胞核染料染色10min，PBS洗涤3次，最后在载玻片上滴加抗荧光淬灭剂进行封固，在荧光显微镜下观察。使用ImageJ软件进行Edu阳性细胞百分比半定量分析。出自《α-酮戊二酸工程化小细胞外囊泡延缓皮肤衰老》作者:吴芷菁,李加利,张佳昕.
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