问:什么是组织块贴壁法分离脐带华通氏胶间充质干细胞?2025-06-03 09:06:38
答:在无菌条件下获取新鲜脐带组织,用磷酸盐缓冲液洗去残留血液,将脐带剪成2-3cm长的小块,机械剥离脐动静脉和羊膜,得到华通氏胶。将华通氏胶剪成体积为1mm3的小块,平铺至6孔板中,加入500μl含3%HPL、100U/ml链霉素以及100U/ml青霉素的DMEM/F12培养基,置于5%CO2、37℃的培养箱中培养。每天用倒置显微镜观察细胞生长情况,待组织块贴附后,每2-3d更换培养基。7d后可见有细胞爬出,14d后细胞汇合至70%-80%,用0.25%胰蛋白酶消化传代,收集细胞,按照5×103个/cm3移至75cm2培养瓶中继续培养。选用P1-P4代细胞进行后续实验。出自《高表达造血支持因子的临床级别人脐带间充质干细胞制备及评价策略研究》 作者:汤杰,李佩霖,张晓宇.
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