问：什么是酶消化法分离脐带华通氏胶间充质干细胞？2025-06-03 09:12:14
答：按上文所述方法分离华通氏胶，然后将华通氏胶剪成体积为２－３ｍｍ３的小块，放入装有０．２％Ⅱ型胶原酶的５０ｍｌ离心管中，在３７℃的恒温摇床上消化２ｈ。消化结束后，离心，弃上清，将剩余未消化完的组织块接种到６孔板中，加５００μｌ含３％ＨＰＬ、１００Ｕ／ｍｌ链霉素以及１００Ｕ／ｍｌ青霉素的ＤＭＥＭ／Ｆ１２培养基，置于５％ＣＯ２、３７℃的培养箱中培养，每２－３ｄ更换培养基。每天用倒置显微镜观察细胞生长情况。大约７－１０ｄ后，可见有细胞爬出；大约１４ｄ后，可见细胞汇合至７０％－８０％，此时用０.２５％胰蛋白酶消化传代，收集细胞，按照５×１０３个／ｃｍ３移至７５ｃｍ２培养瓶中继续培养。选用Ｐ１－Ｐ４代细胞进行后续实验。出自《高表达造血支持因子的临床级别人脐带间充质干细胞制备及评价策略研究》 作者:汤杰，李佩霖，张晓宇.
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