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问:碱性磷酸酶染色检测体外如何诱导成骨分化?2025-06-03 09:15:01

答:分别将组织块贴壁法和酶消化法获得的hUC-MSC按照2×103个/孔接种至48孔板中进行成骨分化诱导,加入成骨分化诱导液(DMEM/F12培养基中添加3%HPL、0.1μmol/L地塞米松、1μmol/Lβ磷酸甘油、0.1μmol/L维生素C)进行定向诱导分化,置于5%CO2、37℃的细胞培养箱中培养,每3d更换一次诱导液;7-10d后,弃去培养基,PBS清洗,4%多聚甲醛固定,去离子水清洗,用碱性磷酸酶试剂(参照说明书)进行避光染色30min,弃去染液,用去离子水清洗至背景干净后,倒置显微镜下观察并拍照。

出自《高表达造血支持因子的临床级别人脐带间充质干细胞制备及评价策略研究》 作者:汤杰,李佩霖,张晓宇.