问：ｈＵＣ-ＭＳＣ造血支持因子表达情况是怎样的呢？2025-06-03 09:16:20
答：收集组织块贴壁法和酶消化法获得的ｈＵＣ-ＭＳＣ，采用ＴＲＩｚｏｌ法提取细胞总ＲＮＡ。通过分光光度计检测吸光度值来测定所提取 ＲＮＡ的纯度和浓度，ＯＤ２６０／２８０值介于１．８－２．０之间为质量合格。按照逆转录试剂盒说明书进行操作，采用２０μｌ反应体系（２×ＳＹＲＢＧｒｅｅｎＭiｘ染液１０μｌ，上下游引物各０.４μｌ，ｃＤＮＡ０．２μｌ，ｄｄＨ２Ｏ９μｌ），反应条件参照试剂盒说明书，对干细胞因子、白细胞介素-３、趋化因子配体１２、血管细胞黏附分子１、血管生成素１等造血支持因子的ｍＲＮＡ相对表达水平进行检测。以ＧＡＰＤＨ作为内参基因，采用２－△△Ｃｔ算法进行相对定量分析。出自《高表达造血支持因子的临床级别人脐带间充质干细胞制备及评价策略研究》 作者:汤杰，李佩霖，张晓宇.
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