问:什么是Western blot检测YAP蛋白的表达?2025-06-16 09:08:55
答:第4代骨髓基质干细胞以1×104/cm2的密度接种于6孔板中 (底部为提前配置好的不同硬度聚二甲基硅氧烷),培养7d,通过PIPA裂解液提取细胞总蛋白,于预制胶内总蛋白点样后电泳;电泳结束后转膜,体积分数5%山羊血清室温封闭60min;用稀释比例为1∶500的YAP、GAPDH一抗4℃孵育过夜;用稀释比例为1∶10000的HRP标记的二抗室温孵育1h;ECL化学发光剂在化学发光成像系统上曝光并摄像。以GAPDH为内参,采用ImageJ图像处理软件进行定量分析。出自《细胞外基质硬度影响骨髓基质干细胞的增殖活性》 作者:高丰,王纪亮,王洪波.