分子印迹聚合物技术在环状双价核酸适配体筛选中的应用2025-07-08 08:45:07
在单一适配体与其他靶向配体组合的启发下,双特异性适配体的递送策略可进一步优化为多功能整合平台:在纳米载体表面同时修饰2条针对CSCs不同表面标志的适配体,一方面增强对肿瘤干细胞亚群的精准识别与结合,另一方面在同一体系内兼顾不同受体介导的内吞机制,从而促进药物累积与胞内释药。Lu等开发了一种基于金纳米粒子的双特异性适配体嵌合体,作为新型溶酶体靶向嵌合体用于降解ABCG2蛋白。该系统通过将抗IGF2R适配体和抗ABCG2适配体锚定于金纳米粒子表面形成三聚体复合物;蛋白质印迹和流式细胞术分析显示,800nmol/LAuNP-APTACs可分别诱导62%的ABCG2总蛋白降解和38%的膜表面表达降低;另外还通过共聚焦显微镜观察证实了荧光素酰胺标记的复合物与溶酶体共定位;在HepG2和阿霉素耐药细胞细胞中,AuNP-APTACs处理24h后显著增加Dox的细胞内积累,使IC50从136μmol/L降至65μmol/L,并导致细胞凋亡和坏死增加2.7倍,表明其成功逆转了多药耐药性。
Ma等开发了基于分子印迹聚合物的体外筛选方法,用于设计特异性结合ABCG2的环状双价核酸适配体;通过模板固定、首次定向印迹、包覆和模板去除这4个步骤合成cMIP;合成的cMIP表现出优异的硼酸亲和力和特异性,对目标肽的交叉反应率低于11.6%;透射电子显微镜表征显示cMIP形态均一,平均直径约150nm;随后利用cMIP进行SELEX筛选,将FAM标记的单链DNA库与ABCG2胞外区域的胰蛋白酶消化产物孵育,通过磁分离富集高亲和力序列后,将筛选获得的单链适配体通过互补序列构建成环状双价适配体。
出自《肿瘤干细胞标志物及其适配体研究进展》 作者:潘尚阳,张文静,陈晓阳.