间充质干细胞分离培养技术的标准化与优化2025-07-21 08:48:15
胚胎干细胞的分化调控是一个复杂而精细的过程,涉及众多信号通路和转录因子的相互作用。目前已知的关键信号通路包括Wnt、Notch、BMP等。其中,Wnt信号通路在胚胎干细胞向神经细胞分化过程中起着重要作用,激活该通路可促进神经前体细胞的产生。转录因子如Oct4、Sox2、Nanog等形成调控网络,维持胚胎干细胞的多能性状态,当这些转录因子的表达水平发生改变时,可诱导胚胎干细胞向特定方向分化。此外,染色质修饰、非编码RNA等表观遗传调控机制也在胚胎干细胞分化中发挥着关键作用,通过调控基因的表达,决定细胞的分化命运。常见的培养体系包括有血清培养系统及无血清培养系统。有血清iPSCs培养系统为基础培养基加干细胞级血清,同时添加bFGF等生长因子,此方法对血清要求较高,因此血清是制约细胞培养能否成功的要素之一,同时该体系还需要滋养层细胞,培养方法较复杂。无血清干细胞培养系统简化了细胞培养流程,为一种专用的iPSCs培养基,其不含血清,也无需要额外添加生长因子,同时摆脱了滋养层细胞的限制,通过包被(如Matrix基质胶包被或Vitronectin包被)培养皿就可以达到细胞贴壁的目的。目前常用Gibco Essential8培养基与Stemcell Technologies的mTesR系统等。
前文提到,间充质干细胞可以从骨髓、白色和棕色脂肪、脐带、胎盘和皮肤等组织中分离获得。它们具有类似特性,来源较为充分,具有较强的生长、分化潜能,适合于较大量地体外培养以及分化机制的研究。除了可以从商品化的细胞库中购买现成的细胞株外,也可以由有资质的研究机构在动物或手术标本中分离纯化获得原代干细胞。目前针对原代间充质干细胞的分离方法,根据不同来源选择不尽相同的策略。
出自《干细胞与人类健康研究进展》 作者:潘杰,中山皓博.
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