在有条件或资质的生产企业或科研基地，还可采用零下196度至零下4度的温度差冻融浓缩血小板，该处理方法可更好地保存人血小板裂解液中生长因子的活性。以常见的处理方法为例：将人血小板裂解液置于零下30度条件下冷冻至少24小时，再于37度下解冻以诱导裂解，循环3至6次，使血小板中的因子能够充分释放；最后一次融化后通过离心处理，取上层溶液，即为制得的人血小板裂解液。循环冻融是血小板活化的机械方法，该方式处理的人血小板裂解液最大特点是简便、快速且成本较低，同时该方法也避免了使用激活剂及其他不必要的干扰。以循环冻融方式处理人血小板裂解液，关键因素是对冷冻和解冻次数的限定，冻融次数过多会导致生长因子降解；而冻融次数不足则会因血小板破裂而降低生长因子浓度。
 

同时，并非所有的生长因子均能在无外源激活剂的处理下释放出来，因此需针对不同的需求进一步改进冻融处理的条件。另一种制备人血小板裂解液的方法是添加凝血酶与氯化钙等溶液制备成外源性激活剂，以达到诱导内源性凝血酶生成、纤维蛋白原形成和血小板脱颗粒的目的。激活剂与富血小板血浆的比例常为1比9；激活后于37度条件下孵育30至120分钟；再将混合物于零下80度条件下冻存60至120分钟；最后将混合物于37度条件下解冻5分钟，并在4度条件下冷却60分钟，使纤维蛋白原聚结，再通过离心处理，获取上清液。该方法在制备过程中通过温度差的调节，可逐步去除纤维蛋白原，并在制备过程中将血小板外膜、细胞碎片等从溶液中去除。
 

出自《人血小板裂解液的临床研究进展及制备技术的初步探讨》作者王瑜，孔维臣，王玉霞。