生物活性物质在干细胞培养与组织修复中的双重作用2025-10-13 08:36:58
溶剂去污剂法处理可实现血小板溶解和脂质包被病毒灭活的双重目标。在常规处理方法中，人血小板裂解液需经离心去除细胞碎片和纤维蛋白原凝块；对于不去除纤维蛋白原的程序，一般会在培养基中加入0.6％的肝素进行抗凝处理。溶剂去污剂法制备人血小板裂解液的过程较其他几种方式繁琐：先将浓缩血小板与1％磷酸三正丁酯和1％曲拉通X-45在25度条件下持续轻轻搅拌1小时，将人血小板裂解液转移至血袋中，加入10％大豆油充分搅拌约30秒，再以每分钟40转的转速于25度下混合振荡30分钟使水油分离；从袋子底部收集人血小板裂解液以去除上层油相；最后通过加入十八烷基（每7毫升人血小板裂解液中加入1克十八烷基粉末）去除残余的溶剂去污剂；十八烷基处理过的人血小板裂解液在22度下6000倍重力加速度离心30分钟，上清液经0.22微米滤膜过滤除菌后备用。溶剂去污剂法处理人血小板裂解液是最有效的病毒灭活程序。通过病毒灭活处理，可提高人血小板裂解液制剂在干细胞临床级补充剂的病毒安全性。但对于非包膜病毒（如甲型肝炎病毒）的安全性需逐个进行风险评估；溶剂去污剂处理人血小板裂解液的另一个缺点是对溶剂去污剂进行特定的处理步骤，处理过程中也增加了一定风险。
研究表明，采用溶剂去污剂病毒灭活处理人血小板裂解液，用于培养沃顿胶间充质干细胞，实验结果表明，该方法不会影响沃顿胶间充质干细胞的扩增和分化，表明溶剂去污剂处理的人血小板裂解液亦可作为可靠的临床替代品。人血小板裂解液是一种具有广阔前景的生物活性物质，其不仅可作为生长因子用于体内伤口愈合和组织修复，还可用于体外扩增人类干细胞和祖细胞。
出自《人血小板裂解液的临床研究进展及制备技术的初步探讨》作者王瑜，孔维臣，王玉霞。
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