BCL11A增强子编辑策略的临床转化进展2025-11-06 08:44:35
CRISPR技术出现后，其灵活与高效的特点使研究人员能够非常便捷地在HSPC基因组靶点制造双链DNA断裂，迅速成为β-地贫基因治疗中极具潜力的工具。2016年有研究表明通过递送Cas9/sgRNARNP靶向镰刀状贫血患者来源造血干细胞，他们利用导入的AAV模版在HBB基因上诱导同源重组，以期修复患者HSPC中的HBB基因。最终他们在患者的HSPC中实现了19％～29％的同源重组效率。为了保证能够富集到足够的治疗性HSPC，课题组利用同时导入的tNGFR标记结合磁珠分选的方法来富集正确修复的CD34+细胞。在小鼠实验中，这些修复的细胞能够重建长期多谱系造血，并分化为正常红细胞，表达具有功能的β-珠蛋白。该研究成果表明，通过基因编辑直接修复HBB基因理论上能够使患者的造血干细胞恢复正常造血功能。然而尽管制造双链DNA断裂能够促进同源重组，但其效率仍然不足以支持体外编辑和回输治疗，因此在2019年吴宇轩等人利用电转RNP的形式靶向造血干细胞中BCL11A+58增强子区域，特异性破坏增强子内的GATA结合位点。
该结合位点被破坏后，能够在红系细胞中特异性地敲除转录抑制因子BCL11A，从而导致γ珠蛋白重新开启表达。更为重要的是该策略无需依赖HDR，在造血干细胞中的编辑效率最高达到了98％以上。编辑后细胞内胎儿血红蛋白水平提升至47.5％和63.6％，均达到了治疗水平。这种无需筛选或体外扩增的高效编辑策略，为β血红蛋白病的临床治疗提供了可行的方案。次年美国CRISPRTherapeutics公司便利用该策略为镰刀状贫血患者进行了基因治疗临床试验。
出自《基因治疗助力β-地中海贫血迈向一次性治愈》作者刘明耀。
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