IFN-γ激活MSCs的生物标志物分析2025-11-10 08:36:10
由于生物测定法存在耗时、PBMC批次间差异大以及无合适的对照品等缺点,替代方法日益受到关注。当MSCs体外暴露于促炎因子时,MSCs将经历极化,由静息状态变为激活/启动状态,比较静息和激活/启动状态下MSCs免疫相关的表面标志物、分泌或转录水平的差异是MSCs生物学效力测定的替代方法。单一测定可能很难预测效力,建议采用测定集合的方法,并需要建立替代方法与效力之间的相关性。MSCs活化方法很多,如IFN-γ,TNF-α或IL-1β处理,ISCT推荐用IFN-γ处理MSCs12~48h。经IFN-γ活化的MSCs,其表面标志物CD40、人类白细胞抗原-ABC、HLA-DR、PD-L1和细胞间黏附分子-1的表达量显著升高,IDO,CXCL9,CXCL10,CXCL11和Ⅱ类主要组织相容性复合物反式激活因子的转录水平提高了千倍以上。Guan等使用流式细胞术评估了一组生物标志物,结果显示,IFN-γ激活后MSCs中IDO-1和PD-L1的表达水平与为期5d的MLR实验中T细胞增殖抑制呈正相关,而骨髓基质抗原2、血管细胞黏附蛋白-1或细胞间黏附分子-1的表达水平与此无关。
纳涛等以IFN-γ激活MSCs,建立并优化了一种基于IDO的快速评价MSCs免疫调控功能的吸光光度法。Lee等检测了来自13个不同供体的骨髓间充质干细胞中6种免疫抑制基因的转录水平,结果显示其中TSG-6的水平与治疗3种小鼠无菌炎症的疗效相关。另外预测MSCs效力的生物标志物是COX2和PGE2。Kota等的研究表明,来自不同羊水和骨髓供体的MSCs制剂具有不同水平的COX2和PGE2基因表达,COX2和PEG2基因的表达水平与体外培养的MSCs的抗炎特性以及创伤性脑损伤大鼠模型中小胶质细胞积累和激活的减少有关。
出自《间充质干细胞生物学效力检测方法研究进展》作者王进美,秦美蓉,王平。
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