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L-组氨酸是一种半必需氨基酸2021-12-28 10:03:39

组氨酸是一种半必需氨基酸, 其具有特殊的生理学作用, 比如组氨酸能降低胃液酸度、缓和胃肠手术时的疼痛、减轻妊娠期呕吐及胃部灼热感、抑制由植物神经紧张而引起的消化道溃疡. 此外, 组氨酸还常用于心绞痛,心功能不全等疾病的治疗. 因此,高灵敏度和高选择性的组氨酸定量检测方法的提出, 对于组氨酸相关疾病的诊断与治疗都具有重要意义.
基于L-组氨酸依赖性的DNAzyme可实现对L-组氨酸的特异性检测.近年来,为了提高组氨酸定量检测的灵敏度和选择性, 科学家们做出了不断努力, 俞汝勤课题组基于L-组氨酸依赖性的DNAzyme和荧光级联催化信标构建了L-组氨酸检测体系, 但是由于它缺乏相应的信号放大单元, 导致传感器对目标分子检测的灵敏度并没有得到非常显著的提高.为了进一步放大检测信号,曹忠课题组提出用核酸切刻内切酶N.BstNBI作为检测体系的信号放大单元, 使得L-组氨酸依赖性的DNAzyme由于自剪切作用而游离出的DNA片段与固定在电极上的发卡结构DNA发生的杂交与酶切反应得以进行多圈循环, 从而产生电化学信号循环放大的效果, 以此提高对L-组氨酸检测的灵敏度.
 
同时,通过降低背景信号也能有效提高检测灵敏度, 而通过巧妙的设计引入一种背景抑制剂来暂时关闭体系本身的信号, 能够有效降低背景信号, 让只有在待测物出现时才释放出信号. 例如, 罗红群课题组在检测体系中引入氧化石墨烯(GO),用以降低检测荧光背景信号, 他们利用Klenow Fragment, Exo-聚合酶辅助的双重目标循环放大和GO辅助的背景信号降低策略构建了一种DNA传感器用于L-组氨酸的检测. 由于同时采用了信号放大和背景降低策略, 使得该传感器对于L-组氨酸检测的灵敏度达到了1.73 pmol/L。
 
出自《脱氧核酶在生物检测及基因治疗中的研究进展》作者范思思, 程进, 冀斌,。