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5-氟尿嘧啶毒性评价模型的构建与研究2026-05-11 09:11:02

本研究旨在利用hiPSC来源的HIO,通过不同浓度与不同时长的5-FU处理,筛选出最优的药物处理条件,以构建一个稳定、可重复的药物毒性评价模型。该模型的建立将为类器官在药物毒理学中的应用提供实验依据,并为后续深入研究5-FU的分子毒性机制提供可靠平台。人诱导多能干细胞购自赛贝生物公司,使用mTeSRTM1培养基(赛贝生物)在37℃、5%CO2条件下的细胞培养箱中进行培养。每日通过显微镜观察细胞形态并记录其生长状态,以确保细胞保持良好的未分化状态。当细胞融合度达到70%-80%时,以1∶3的比例进行传代培养。

Matrigel低生长因子基质胶、Matrigel基质胶、细胞培养皿、细胞培养板,均购自美国Corning公司;Y27632、R-spondin-1,均购自中国MCE公司;PGM1人多潜能干细胞培养基、DissEasy人多潜能干细胞消化液,均购自中国赛贝生物公司;青-链霉素(1×)、环保型脱蜡透明液、PBS、山羊血清、抗荧光淬灭封片剂、柠檬酸钠修复液、组织自发淬灭剂、RNA提取液、无菌离心管,均购自武汉塞维尔公司;无水乙醇、95%乙醇、75%乙醇、氯仿、异丙醇,均购自国药集团化学试剂有限公司。
 
FOXA2抗体、CDX2抗体、KLF5抗体,均购自美国Proteintech公司;DAPI染液购自北京索莱宝公司;GoatAnti-RabbitIgGH&L(购自英国Abcam公司);RPMIMedium1640basic(1×)培养基、GlutaMAXTM(1×)补充剂、AdvancedDMEMF12培养基、N2补充剂、B27补充剂,均购自美国Gibco公司;ActivinA购自美国R&DSystems公司;CHIR99021、EGF、FGF2、Noggin,均购自加拿大StemCellTechnologies公司;FGF4(购自中国近岸蛋白公司)。HEPES缓冲液、恒温水浴锅、细胞培养箱,均购自美国ThermoFisherScientific公司;超净工作台购自北京东联哈尔仪器公司;倒置显微镜购自日本Olympus公司。
 
出自《5-氟尿嘧啶致人源肠道类器官损伤的研究》作者方佳瑞,李晓彤,朱恒。