将解离后的类器官均匀接种至多孔板，与梯度浓度的药物共培养数日后，进行终点检测。最常用的检测方法主要分为两类：一是基于生化反应的检测，可采用CellTiter-Glo试剂测定ATP活性等方法以评估细胞活力；二是基于活细胞成像的形态学分析，通过自动化高内涵成像系统定量分析类器官的数量、大小或特定荧光标记的变化。为克服传统方法在通量和准确性上的局限，当前研究正致力于整合微流控器官芯片、自动化液体处理和人工智能驱动的图像分析技术，以实现更高通量、更标准化且能捕捉复杂表型变化的药敏筛选平台。
 

目前，类器官已经成为研究人类及其他生物体组织发育、再生与修复机制的重要工具。类器官在分子组学特征上与来源组织高度一致，在一定程度上反映体内药物反应特征，已广泛应用于药物开发和疾病机制研究。其中，PDOs对于临床转化的核心应用价值主要体现在：个体化精准治疗的临床指导潜力。2018年，Science首次报道PDOs的临床预测能力，Vlachogiannis等人构建了71例胃肠道肿瘤患者的PDOs，其药敏结果与患者临床治疗反应一致性达87％。
 

该研究提示，PDOs模型可有效预测个体对不同药物的敏感性，为优化治疗方案选择、减少无效或低效治疗提供依据。肿瘤内在异质性及相关信号通路研究模型。PDOs在一定程度上保留原发肿瘤的遗传特征和细胞异质性，为肿瘤发生发展及耐药机制研究提供更接近体内状态的实验体系。联合单细胞测序，PDOs可用于揭示化疗耐药中Wnt通路激活的时空动态特征，为识别并靶向耐药细胞亚群奠定研究基础。新药研发与药效评估平台。PDOs体系为抗癌药物的体外筛选和功能验证建立高通量、个体化的实验体系，有望缩短新药研发周期。
 

出自《患者来源肿瘤类器官临床药敏检测的回顾性分析》作者石铭, 高竟焜, 吴嘉兴。