共孵育法操作简单，但装载效率可能受限；而物理方法虽效率较高，却可能对EVs结构的完整性造成一定影响。不同工程化方法在EVs产量、载药效率与EVs完整性之间需要进行综合考量，需根据药物特性与治疗目标进行理性选择。代谢重编程障碍阻碍了巨噬细胞向M2型的功能转换，从而促进牙周炎等炎症性疾病的慢性进程。工程化EVs通过递送特定效应分子，重塑牙周炎的免疫稳态。例如，工程化EVs通过递送miR-1246、miR-126或过表达CD73，可有效诱导巨噬细胞由促炎表型向抗炎表型转化；针对牙周炎中Th17/Treg细胞失衡促进骨丢失的机制，工程化EVs递送miR-125a/b通过抑制信号转导及转录激活因子3通路，调节T细胞分化平衡，抑制Th17细胞分化并促进Treg细胞扩增。
 

此外，工程化EVs还能直接干预免疫代谢，如负载阿司匹林的工程化EVs，可重塑巨噬细胞的代谢方式，增强氧化磷酸化并抑制糖酵解，从而改善牙周炎的免疫微环境；经单宁酸修饰的EVs可递送四聚体丙酮酸激酶，重编程免疫代谢状态以治疗牙周炎。在炎症微环境重塑层面，工程化EVs主动清除组织修复的炎性障碍。过量ROS会加剧牙周细胞损伤，工程化EVs可通过传递二氧化铈纳米颗粒或单宁酸－铁复合物等抗氧化分子，降低ROS水平，减轻氧化应激损伤，修复线粒体功能，为组织修复创造良好微环境。
 

通过亲本细胞基因工程技术，使PDLSCs来源的EVs过表达FoxO1，减少ROS在PDLSCs和巨噬细胞中的积聚，以增强其抗氧化和抗炎功能。牙周炎会驱动细胞衰老并伴随凋亡抵抗。工程化的间充质干细胞凋亡囊泡通过递送关键分子丙酮酸激酶M2至细胞核，并增强内源性PKM2的核转位，可恢复衰老细胞的凋亡敏感性，从而在动物模型中有效清除衰老细胞，减轻骨吸收和全身性炎症。这揭示了一种利用工程化EVs靶向清除炎症驱动衰老细胞、打破“炎症－衰老”恶性循环的新治疗策略。

出自《工程化细胞外囊泡在牙周炎治疗中的研究进展》作者蒋珊，钟雯婕，高翔。