基因编辑治疗目前尚处于细胞和动物实验阶段2022-01-10 09:41:32
大型哺乳动物模型是从小鼠模型跨越至人类患者的桥梁。deltaE50．MD（AEx50）犬模型是DMD基因内含子50发生错义突变，自发跳跃外显子50，导致阅读框移码，其病程进展、严重程度较mdx小鼠更接近人类患者。2018年，Amoasii等首次实现对Duchenne型肌营养不良症犬模型进行基因编辑：于1月龄△Ex50模型犬肌肉注射（2只）或静脉注射（2只）AAV9 CRISPR．Cas9基因和靶点为外显子51剪接受体位点的sgRNA．51，肌肉注射6周和静脉注射8周后，逆转录．聚合酶链反应（RT．PCR）显示外显子49剪接至外显子52，恢复正常阅读框；免疫组织化学染色、蛋白电泳检测，dystrophin蛋白在模型犬心肌和膈肌的表达水平明显升高。该实验具有基因编辑从动物模型向临床治疗过渡的里程碑意义；然而，由于样本量较小、持续时间较短，以至于未观察到长期治疗效果和潜在的免疫反应，而且存在模型犬年龄对应人类患者年龄较小、观察指标不完善等局限性。虽然，基因编辑治疗目前尚处于细胞和动物实验阶段，但已展现出诱人的前景，该治疗方法旨在恢复有功能的dystrophin蛋白的表达水平，增强肌力，以期提高运动功能、呼吸功能和心功能等。低水平的dystrophin蛋白表达恢复仍可以增强Duchenne型肌营养不良症小鼠肌力。由于反义寡核苷酸介导的外显子跳跃治疗的作用靶点为DMDmRNA，不能产生持久性疗效，故患者需定期给药；基因编辑虽可产生持久性疗效，但仍存在脱靶问题，若发生安全问题，这种持久性改变将会使治疗造成的影响难以终止，同时尚存在病毒载体的安全性和免疫反应问题。
出自《Duchenne型肌营养不良症基因治疗进展与思考》作者张成,林金福,廖子钰。
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