基因治疗的策略中病毒载体应用最为广泛，病毒载体主要包括逆转录病毒、慢病毒、腺病毒、腺相关病毒、疱疹病毒等。一方面病毒本身的免疫原性、细胞毒性和溶瘤作用治疗之外;另一方面，由于病毒载体能够将携带的目的基因整合至所感染细胞的染色体中，研究者在载体上整合不同的治疗基因，这样与病毒的毒性影响达到双重杀伤作用，形成多种治疗方式。然而不同病毒载体均有各自的优势和局限性。最初的基因治疗研究都是以逆转录病毒为载体，因为它可以与宿主的基因组相结合，研究最广泛的载体是莫洛尼鼠白血病病毒。
 

它由末端是5‘和3‘重复序列编码的双链ＲNA组成，5LTＲ毗邻逆转录起始区域，紧挨着的是包装序列gag、pol和env基因，他们分别编码病毒结构蛋白、核蛋白（gag）;蛋白酶、逆转录酶/ＲNA酶（pol）; 还有包膜糖蛋白（env）。Gag、pol和env基因在载体上被选择基因的cDNA所取代，插入片段与载体上的包装信号组成了重组逆转录病毒载体，除此之外，还需要能够持续表达病毒的gag、pol和env基因的细胞系，来提供辅助作用完成病毒的表达。即可将逆转录病毒载体由两部分构成:一是用含有多克隆位点的重组逆转录病毒载体，将gag，pol，env结构基因去除，保留了包装信号及其相关序列;二是可以提供逆转录病毒蛋白质的包装细胞系，常用的如HEK293，在包装细胞系染色体中整合有包装信号。将逆转录病毒质粒转染293细胞进行同源重组，梯度离心后收集含有重组的逆转录病毒颗粒的溶液。
 

逆转录病毒能够整合入宿主的基因组，它的生物学特点决定了其可以使外源基因表达持久而稳定的优点。存在的主要问题是:（1） 其偶然性的随机整合会导致插入诱变，原癌基因的激活或者肿瘤抑制基因的失活等有害影响。（2）逆转录病毒只能够选择性感染分裂细胞，一旦产生可复制的病毒将非常危险;然而其突出的特点至今仍作为许多基因实验的首选而被尝试。
 

出自《病毒载体系统介导的肿瘤基因治疗》作者呼佩霓,朱志, 王艺桥。