vvIBDV的VP1M增强病毒在CEF上的复制力2022-02-11 09:41:04
BDV基因组B节段仅编码一个VP1蛋白，RNA依赖的RNA聚合酶。VP1蛋白是病毒复制所必须的。根据VP1三维结构，VP1可以分成三个结构域，即N端（VP1N）、中心活性区（VP1M）和 C端（VP1C）。VP1N（1-167aa）与病毒复制和转录有密切关系，VP1M（168-658aa）与核苷酸的识别与结合相关，VP1C（659-878aa）与病毒复制相关。在本研究中，针对VP1蛋白的三个结构域，通过反向遗传学进行 IBDV 拯救获得了一系列的重组毒株。以IBDV B87疫苗株为母本病毒，分别替换了vvIBDV NN1172株病毒VP1的三个结构域，获得了拯救病毒rB87A-NN1172VP1N、rB87A-NN1172VP1M和rB87A-NN1172VP1C。同时也拯救获得了替换NN1172株整VP1蛋白和整个基因组B节段的重组毒株rB87A-NN1172B和rB87A-NN1172VP1。通过对所有拯救病毒进行复制动力学分析，找出IBDV基因组B节对病毒复制的影响，为下一步通过反向遗传学的方法获得IBDV候选疫苗株提供基础。通过复制动力学分析，将IBDV B87疫苗株基因组B节段替换为vvIBDV NN1172株的B节段，拯救病毒rB87A-NN1172B的复制能力增强。替换整个 VP1 基因的拯救病毒 rB87A-NN1172VP1复制能力显著增强。进一步对VP1蛋白三个结构域进行替换，拯救病毒rB87A-NN1172VP1N、rB87A-NN1172VP1M和rB87A-NN1172VP1C之间的复制能力差异明显。vvIBDV的VP1N可以降低病毒在CEF上的复制能力。vvIBDV的VP1M可增强病毒在 CEF 上的复制能力。vvIBDV的VP1C对病毒的复制能力的影响并不显著。Boot等通过反向遗传学拯救了基因组A节段为弱毒、B节段为vvIBDV重组毒株rCEF94-vvB，同时拯救了基因组A节段为vvIBDV、B节段为弱毒的重组毒株rD6948HT-ccB。体外试验表明重组毒株 rCEF94-vvB 在 QM5 细胞上的复制能力降低了，而rD6948HT-ccB在QM5细胞上的复制能力增强了。
出自《传染性法氏囊病病毒分子流行病学及新型疫苗的研究》作者陈果。
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