本研究将PCV2 HeB-1株的ORF2基因与新型分子佐剂——补体C3d-P28进行融合，开发了一种新型DNA疫苗（pVOC3），可显著提高疫苗对仔猪的体液免疫与细胞免疫效果，并对PCV2b 和 PCV2d基因型毒株提供交叉保护，显示了良好的应用效果。利用马赛克T-细胞疫苗设计与诱骗表位替换，最后通过病毒拯救获得一株马赛克PCV2 SD株。该马赛克 PCV2 SD株制备的疫苗检测不到诱骗抗体，且对 PCV2 病毒的中和抗体水平提高 1.6 倍以上。本研究为广谱高效PCV2疫苗的开发提供了物质基础，同时也为其他疫病的高效疫苗开发提供了借鉴。
 

将含PoIFN-γ的真核表达质粒转染PK-15 细胞，获得一株可稳定表达PoIFN-γ的细胞系。该细胞系可增强马赛克PCV2 SD株的增殖效率，用于 PCV2 全病毒灭活疫苗生产，可显著提高疫苗的生产效率。将改构马赛克Cap蛋白进行大肠杆菌高效表达，重组蛋白可形成完整的病毒样颗粒结构（VLPs），其作为疫苗抗原可保护仔猪免受PCV2d HeB-1株、PCV2b LN-3株攻击，表明制备的改构马赛克Cap蛋白亚单位疫苗对PCV2病毒具有良好的交叉保护效果。
 

制备PCV2病毒单克隆抗体15株，并完成其中4株（2C5、4G7、5F7、6F8）的鉴定。结果4株均为PCV2病毒特异性抗体，其中单抗6F8对PCV2病毒各基因型均有中和活性，单抗2C5仅对PCV2d亚型毒株有中和活性。本研究为Cap蛋白中和表位的解析及PCV2诊断试剂盒的开发提供了物质基础。制备一种PCV2血清中和抗体阻断ELISA试剂盒，并评测了其敏感性、特异性、符合率、批次稳定性、保存期等技术指标，均合格。该试剂盒与细胞中和试验相比，检测灵敏度提高了10倍以上，显示了良好的应用前景。
 

出自《猪圆环病毒2型新型疫苗的研制及中和抗体快速检测方法的建立》作者侯竹美