除了这一成功，我们也意识到使用这种方法大规模生产TM样细胞可能存在的一些问题。无论使用条件培养基还是重组细胞因子，iPSC分化过程中的凋亡仍然是一个基本问题。其中一个原因可能是在分化过程中白血病抑制因子的消失，讨论据报道，这会导致超过30％的干细胞死亡。这些凋亡细胞被认为是无法自我更新的细胞。因此，细胞凋亡是必要的，并且有利于干细胞分化，而干细胞分化是提高分化效率的关键。然而，iPSCs在分化过程中，细胞存活和死亡之间的平衡被破坏，可能会导致细胞活力的过度丧失，这可能会成为大规模生产TM样细胞的困难。另一个问题是可能由于iPSC存活率不同，尿源性TM样细胞和HTM细胞之间的转录差异较大，但与干细胞克隆相比，TM样细胞表现出截然不同的细胞形态。
 

在分化早期，与U2相比，U1/3iPSCs需要更多的时间才能达到100％融合。在两阶段分化后，U1/3TM样细胞的融合程度低于U2来源的细胞。我们的结果表明，使用基于细胞因子的方法来提高分化效率，细胞活力是必要的。综上所述，本研究描述了一种实用的iPSC分化方法来生成TM样细胞，该方法更适合于临床应用。我们确定了iPSC分化的两个不同阶段，并在每个分化阶段选择了高表达的受体，利用相应的重组细胞因子开发了一种新的分化方法。通过这种方法，来自三个个体的人iPSCs都成功地分化为TM样细胞，具有TM的表达物质和地塞米松诱导的CLANs形成能力。
 

出自《诱导性多能干细胞定向分化小梁网的研究》作者王文燕，韩彦弢。