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基于靶向肽技术的工程化外泌体靶向策略2022-10-26 08:58:55

为提升外泌体药物分子负载量,增强治疗效果,可通过药物与供体细胞共孵育或将携带目的基因质粒或病毒转染供体细胞等方式进行装载。此外,小分子核酸和药物还可通过电穿孔、超声、机械挤压、冻融等方式直接封装于外泌体中。

有研究者在293T细胞中表达CD63跨膜蛋白与载脂蛋白A1序列融合基因,使其产生的外泌体具有肿瘤细胞靶向功能,利用电穿孔技术将荧光标记的miR-26a负载于293T细胞来源外泌体中,定向递送至HepG2肝癌细胞,可下调阻滞细胞周期和抑制细胞增殖的关键蛋白表达,降低HepG2细胞增殖和迁移能力。有研究者向心肌细胞转染含miR-486外泌体,可减轻缺氧复氧损伤引起的心肌细胞凋亡,缩小梗死面积;采用电穿孔技术将miR-486抑制剂传递至外泌体中构建miR-486缺失外泌体,发现miR-486缺失外泌体可加剧缺氧/复氧诱导的人胚胎干细胞来源心肌细胞和新生大鼠心肌细胞凋亡。
 
研究表明,心肌球源性细胞分泌的外泌体具有改善心肌重构、减轻急性缺血再灌注损伤的作用,但其心脏趋向性有限。Mentkowski等构建一种可靶向心肌细胞的高效细胞外递送系统,通过质粒克隆等细胞工程方法将心肌细胞特异性结合肽融合到小鼠溶酶体相关膜蛋白2b的外显子N端,使心肌球源性干细胞分泌的外泌体在其表面表达心肌细胞特异性结合肽,并保留其物理特性,使小鼠心肌细胞对外泌体的摄取增加,心肌细胞凋亡减少,外泌体在心脏滞留时间延长。有研究者重建了外泌体溶酶体相关膜蛋白2b并与配体或靶向肽融合以靶向特定器官,利用分子克隆和慢病毒包装技术将缺血心肌靶向肽与溶酶体相关膜蛋白2b融合,使骨髓间充质干细胞来源外泌体优先靶向至心肌梗死小鼠缺血心肌,促进血管生成,改善心功能;缺血心肌靶向肽-外泌体在缺血心脏区域累积,可明显减轻炎性反应、细胞纤维化和细胞凋亡;在体外将缺血心肌靶向肽-外泌体与大鼠成心肌细胞系H9C2共培养,可提高缺氧复氧损伤H9C2细胞对外泌体的摄取效率。
 
出自《工程化外泌体靶向治疗急性心肌梗死研究进展》作者冯小琦,雷桅。