该方法是一种集合了免疫学、细胞生物学和磁力学等理论于一体的高度特异性的细胞分选技术，分选简单快速，2h之内就可以完成细胞分选。不同的细胞分选方法影响细胞的纯度和得率。与以往的报道类似，本实验中采用的Miltenyi生物科技公司的分选磁珠微粒直径仅有50nm，对细胞造成的机械压力相对较小，对细胞无损伤并可生物降解，不干扰流式分选，对细胞的生物学活性和分离后培养没有影响。此外，分选前培养细胞的代数对磁珠分选能否得到良好活性的细胞至关重要。与文献中报道的分离方法的不同的是，我们一般细胞培养5代左右进行分选，此时细胞的数量可达到1×107左右，细胞增殖活跃。另外实验中也尝试了联合采用磁珠分选和流式分选得到的细胞纯度更好，有利于后续的功能学研究。
 

在血管壁干细胞的传代培养过程中，使用含0.2％LIF的高糖培养基DMEM，其中胎牛血清促进血管壁干细胞增殖，LIF可抑制细胞的分化。结合已有研究发现，低密度培养细胞有利于血管壁干细胞干性的维持，而且随着细胞代数的增加，干细胞有可能存在自分化。因此，在血管壁干细胞的传代培养过程中，每间隔3~5代需要进行纯化和鉴定。此外，与以往的报道一致，在实验过程中我们观察到血管壁干细胞的培养和维持对血清成分的要求很高，不同的血清成分及其浓度有可能导致细胞的自分化现象或影响细胞的生物学特性。因此，在分选后细胞的培养过程中血清的选择也是至关重要的。
 

出自《小鼠血管壁CD34+干细胞的分离、培养及鉴定》作者杨礼菊，马颖，李源.