CFSE标记被广泛用于细胞增殖研究2023-04-25 08:55:02
荧光染料受到光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,产生荧光,利用荧光设备追踪荧光从而达到示踪细胞的目的。目前多种荧光染料被用来示踪细胞,主要包括羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂、5-溴脱氧尿嘧啶核苷、PKH26以及亲脂性二烷基碳菁类染料等。CFSE穿过细胞膜进入细胞后,在细胞内酯酶的作用下发生水解,产生明亮的荧光。水解产物与细胞内蛋白的赖氨酸残基或其他氨基共价结合,能够稳定、长期地进行细胞示踪。CFSE标记被广泛用于细胞增殖研究,也被用于在组织切片中定位细胞。Bertelsen等、Montufar-Solis等利用CFSE标记研究内皮生长细胞、脾白细胞在小鼠体内的归巢能力。
BrdU可代替胸腺嘧啶核苷插入复制的DNA双链中,并带到子代细胞中,通过免疫组化或流式检测其掺入的细胞。Yin等通过 BrdU 标记定位细胞,但BrdU对细胞的毒性已有报道,因此干细胞的研究中使用BrdU时需要更加谨慎。PKH26荧光染料通过与膜结构的脂质分子结合标记细胞,呈橙红色荧光。PKH26标记的人脂肪间充质干细胞注射到小鼠玻璃体腔后1个月,视网膜血管仍出现强荧光。亲脂性二烷基碳菁类染料家族主要包括3,3‘-二十八烷氧碳菁高氯酸盐、1,1‘-双十八烷基-3,3,3‘,3‘-四甲基吲哚菁高氯酸盐、1,1‘-双十八烷基-3,3,3‘,3‘-四甲基吲哚菁-4-氯苯盐、1,1‘-双十八烷基-3,3,3‘,3‘- 四甲基吲哚菁高碘酸盐等,4种染料呈现不同的荧光。这类染料自身发光强度弱,一旦对细胞染色,即可发出强烈的荧光。
出自《细胞治疗产品示踪技术研究进展》作者郝晓芳,耿兴超,黄瑛.
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