ATP作为D-荧光素的辅助因子参与生物发光过程2023-04-25 08:59:36
内源性标记使用病毒或非病毒载体将编码蛋白的报告基因转导并整合到细胞基因组中，并通过表达特定的报告基因来标记细胞，如萤火虫荧光素酶基因、绿色荧光蛋白、Lac-Z基因、Y染色体标记等。LUC和D-荧光素系统长期以来被用于各类示踪实验。细胞转染LUC基因后注射到动物体内，在给予D-荧光素后，含有特定基因荧光的细胞发出特定波长的光信号。Liu等将人间充质干细胞用此法基因标记后通过体内生物发光成像评估细胞移植后的存活。LUC的优点是能够提供有关细胞活性的信息，因为ATP作为D-荧光素的辅助因子参与生物发光过程，可以用于研究干细胞的存活和增殖。但是，该系统发射光为536nm，无法穿透哺乳动物组织。为了克服这一限制，研究者开发了高敏感度的报告基因-Antares2，是原始Antares的增强版本。Antares是生物发光共振能量转移报告蛋白，能促进发射光的红移，从而更好地穿透细胞组织。GFP是生物发光蛋白，激发后可稳定地产生绿色荧光。Ruan等将树鼩脐带间充质细胞转染GFP后静脉给予创伤性全身反应综合征树鼩模型，追踪其在脏器中的分布情况。通过上述方法标记的细胞被移植到体内后，需要通过相应的成像技术（如荧光成像、放射自显影、磁共振成像、电子计算机断层扫描等）被追踪。一般来说，外源标记方法简单直接，但存在标记效率低、标记过程不稳定、细胞标记时间短、难以跟踪全过程等缺点。内源性细胞标记的信号不会随着细胞的分裂和增殖而消失，跟踪准确率高，可以实现细胞的长期跟踪，克服了外源性标记的一些不足。
出自《细胞治疗产品示踪技术研究进展》作者郝晓芳,耿兴超,黄瑛.
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