生物反应器培养MSC优于静态培养瓶培养2023-08-15 09:21:59
Hanley等最早比较了生物反应器和培养瓶培养扩增人骨髓MSC的效率以及所获得细胞的功能,结果显示,使用培养瓶培养,细胞可在平均29.8 d内传代3-5次,获得细胞数2.9×10 8,而使用生物反应器培养,平均20.5d细胞传代2次,获得细胞数6.6×10 8,两种培养方式获得的细胞,其表面分子表达、集落形成能力、分化功能及抑制T细胞增殖能力相当。另外,生物反应器培养人工操作次数少,减少了细胞污染的机会。因此,生物反应器培养MSC优于静态培养瓶培养。但是,为使培养的MSC贴壁生长,必须对微载体进行预处理,一般使用价格昂贵的纤黏连蛋白包被,使生物反应器培养成本明显增加。可见,对微载体进行改造,是较低成本条件下扩增MSC的关键步骤。为此,Teale等建立了顺序培养方法扩增人脂肪MSC,即培养瓶静态培养-转旋转瓶培养-体积更大的生物反应器培养连续步骤。在旋转瓶及生物反应器培养中,培养使用的微载体中心是交联的聚苯乙烯树脂,直径200μm左右,表面覆盖人纤黏连蛋白RGD重复片段,以利于MSC贴壁生长,这种微载体可以高压消毒,使用方便。这种方法虽可使MSC大量扩增,但培养时添加微载体的数量限制了最终收获的细胞数量,且作者使用的培养体系只适用于脂肪来源MSC的增殖。Xu等利用新的微载体扩增人脐带MSC,培养液最大体积为5L,培养4d细胞数扩增4倍,达到10 9级别,这种载体为片层结构,由多个直径为200μm的微载体组成,微载体为多孔结构(孔径约为20μm),有利于细胞黏附。
出自《间充质干细胞胞外囊泡成药性研究进展》作者刘玉爽,孙媛,郭子宽.
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