细胞膜组成可能与静态培养的MSC不同2023-08-16 08:45:11
上述规模化培养技术相对成熟且实用，但所用培养体系体积较小，且每个步骤都需要蛋白酶消化，影响细胞活性及细胞获得率。Chen等研制了一种改良的培养方法，避免了逐步酶消化，使一次培养上清总体积达到50L，研究者从总体积20ml的旋转培养瓶开始，将细胞微载体及旧培养基逐步转移至培养液总体积达到50L的搅拌釜式生物反应器中，期间加入新鲜的微载体及培养基，在培养过程中细胞向新的微载体迁徙，微载体集聚现象减少，细胞产率增加，细胞在培养27d后总数扩增242倍，数量达到1.45×10 10。Hanga等利用新型培养材料作为微载体培养MSC，将氟化碳液滴浸泡于富蛋白质培养基中，MSC贴附于液滴表面生长，细胞收获时使用无钙镁离子的缓冲液洗涤，氟化碳聚合，细胞从液滴表面脱落，氟化碳和细胞形成双象，6d内细胞扩增3-6倍，且收集细胞后细胞特征不变。Krutty等将高分子聚合物PVD包被于聚苯乙烯树脂微载体表面，利用这种新型的微载体培养MSC，细胞通过整合素途径与载体结合，培养结束后只需使用EDTA即可实现细胞与微载体的分离，避免了蛋白酶消化对细胞的损伤，获得了良好的效果。由此可见，培养扩增步骤的简化以及微载体的优化，仍是规模化扩增MSC的关键。上述技术的进一步成熟，以扩大培养体积，有可能是未来扩增MSC的方向之一。此外，生物反应器培养下的MSC，受液体剪切力的影响，其细胞膜组成可能与静态培养的MSC不同，代谢组学分析结果提示，生物反应器培养的MSC细胞膜脂类物质，包括磷脂酰丝氨酸和磷脂胆碱含量远高于静态培养下的MSC。
出自《间充质干细胞胞外囊泡成药性研究进展》作者刘玉爽,孙媛,郭子宽.
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