scRNA-seq技术是世界上第一例单细胞测序2024-03-08 09:58:13
2009年对哺乳动物小鼠的单胚层和卵母细胞进行了scRNA-seq,是世界上第一例单细胞测序。当时仅能检测少量细胞,且成本高昂,限制了这种技术的大规模使用。随着单细胞测序技术的不断成熟,已经有几十种不同的测序技术被研究出来。2015年,Drop-seq以及inDrop两种技术将微流体技术和scRNA-seq相结合,Cyto-seq将微孔板技术与scRNA-seq相结合,使快速、低成本地分析数千个细胞的基因表达成为可能。2017年以来,分别基于Drop-seq和 Cyto-seq原理的10X Ge-nomicsChromium以 及BDRhapsody测序平台相继问世,标志着低成本的商业化单细胞转录组测序技术时代的到来。除了这些技术,Smart-seq、MARS-seq、Microwell-seq等技术也在被使用,其中Smart-seq技术能够得到全长的转录本,但其局限性为低通量、高成本,近年来科学家们在此技术的基础之上不断进行改进,开发出了Smart-seq2、Smart-seq3技术,不断降低测序成本,提高样品处理量。目前scRNA-seq技术已经开发出许多分析方法,主要包括数据预处理、一般分析和探索性分析。
数据的预处理包括质控、比对和量化;一般分析包括低质量细胞过滤、归一化、高度可变基因选择、降维、聚类和细胞类型注释;探索性分析包括差异基因分析、功能富集、基因集变异分析、转录因子预测、细胞轨迹、细胞-细胞相互作用、细胞周期和空间转录组分析。
出自《单细胞RNA测序技术在胶质母细胞瘤研究中的应用》作者宋萍,邓慧,张孟贤.
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