红细胞的制备和储存2021-11-30 08:55:00
取健康雄性23-25g的C57BL/6J小鼠，戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠（其注射量按75mg/kg 体重计算），放于鼠盒，约5分钟即可麻醉。将放在超净工作台的小鼠呼吸机连接好线路，按 10μL/g（小鼠体重）调节呼吸机潮气量，呼吸频率为120 次/分，打开开关。将小鼠仰卧位固定于37℃加热垫上，用胶布固定其四肢，用细线套过门齿连接恒温垫螺丝以固定头部。用理发剪去除颈部气管周围和腹部毛发，75％酒精消毒皮肤。小心的将小鼠颈部喉下方的上皮剪开一个沿气管方向的口，用镊子分开脂肪组织，暴露气管，沿气管的垂直方向用剪刀小心的剪开气管的1/2 口，然后从剪口处沿气管到肺的方向剪开尽可能小的一点，将呼吸机的Y型管顺气管到肺的方向，缓慢插入气管。无菌情况下，小心剪开胸腔，暴露整个心脏，用含有0.1mL枸橼酸-磷酸盐-右旋糖-腺嘌呤-1的1mL注射器以与桌面平行的方向，对准心脏的左心室刺入心脏，缓慢抽取血液。取完血后拔掉针头，将血液沿 10mL 离心管壁缓慢打到管内。重复以上操作，对20只左右小鼠进行取血，并使CPDA-1的最终浓度为14％。将白细胞滤器上端接去除针头和活塞的10mL无菌注射器，下端接空的10mL无菌离心管，并使滤器下缘紧贴离心管壁，缓慢地将刚取的血液倒入注射器内，待其自然流下，通过白细胞滤器，以达到去除白细胞的目的。将装有去白全血的离心管，以 400g 转速离心15分钟。去上清，使其红细胞压积（Hct）为70％-75％。将血液分装到0.6mL无菌离心管中，使离心管中尽可能少留空气。低温 4℃储存。储存时间小于2小时（新鲜红细胞，FRBC）或 14天（储存红细胞，SRBC）。
出自《丙酮酸钠减轻红细胞储存损伤及输注后肝损伤的研究》作者夏厦。
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